老何苗木

 

    大花月季(Hybrid Tea)属蔷薇科蔷薇属，世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一，其植株健壮，花朵大，花型高雅优美，花色丰富、具有很强的观赏性，被广泛地用作地被绿化材料来布置花镜、花坛、月季园造景等。大花月季的常规繁殖为扦插，繁殖系数低，速度慢，并容易造成病毒的积累，降低品质。应用组织培养技术对大花月季进行快速繁殖不仅能够保持母本的优良性状，而且可以大大缩短其增殖周期，实现周年连续生产。对大花月季的离体快繁技术进行了研究，以期找到其组培快繁的最佳培养基配方，为其工厂化生产服务。

1试验材料

    德州学院校园内的大花月季。

2试验方法

2．1无菌体系的建立

2．1．1  培养基  MS+6-BA 2．0 mg／L+NAA 0．1 mg／L+蔗糖30g／L+琼脂7 g／L，pH 6．0。

2．1．2材料处理与接种从大花月季植株上，选取健壮的当年生嫩梢，长6 cm左右，去掉大的叶片，然后均匀切成3段，分别选取嫩梢顶部、中部、基部的茎段各20个，用流水冲洗干净，在无菌条件下用75％的酒精消毒20 S，再用0．01％的升汞溶液加适量吐温液消毒5 min，最后用无菌水冲洗3～5遍，接种于培养基上。

2．1．3培养条件培养温度为25℃，光周期为12 h／d，光强为2000 Ix左右。

2．2增殖培养

    将初始培养获得的无菌苗剪成2～3 cm的小段，继代到不同的增殖培养基上，每种培养基接种20瓶，每瓶3个，增殖培养基配方见表1。

2．3生根培养

    取生长健壮的的组培苗转移到生根培养基上诱导生根，每种培养基接种10瓶，每瓶3个，生根培养基见表1。

表1   培养基配方

注：以上培养基都附加蔗糖30 g／L、琼脂7 g／L，pH：6。

3结果分析

3．1不同的外植体对无菌体系建立的影响

    不同部位的茎段，在含相同激素的培养基上表现出不同的生长趋势，顶部茎段顶芽生长较快，无褐化，但萌芽数少，中部和基部的茎段芽萌发生长较慢，但萌芽数较多，芽后期生长快；基部茎段的褐化程度重于中部茎段。

    试验结果表明：大花月季无菌体系建立时最适宜的外植体为嫩梢中部的茎段，因为中部和基部的侧芽比较饱满健壮，而靠近顶部的芽发育尚不成熟，且顶芽的存在抑制了侧芽和不定芽的萌发；而基部的茎段由于组织比较老，褐化率高于中部和顶部茎段。

3．2不同的激素浓度对增殖培养的影响

    通过对大花月季的增殖培养发现：6-BA浓度在0．5～3．0 mg／L的范围内均能实现芽的增殖效果，但不同的6-BA、NAA浓度组合，增殖效果及苗的颜色也有所不同。当6-BA浓度为2．0 mg／L和NAA浓度为0．5 mg／L时，茎段增殖率最高，但是苗生长矮小，叶黄，生长状况不佳；6-BA浓度为1．5 mg／L，NAA浓度为0．1mg／埘，苗的增殖率相对比较高，且苗生长高、壮，颜色浓绿，因此最适宜的增殖培养基为：MS+6-BA 1．5 mg／L+NAA0．1 mg／L。具体试验结果见表2、图1。

3．3生根培养

    大花月季在不同培养基上的生根培养发现：1／2 MS附加0．05 mg／L和0．1 mg／L的NAA和IBA均可诱导不定根的产生，但生根率和根的生长状况不同，附加0．05 mg／L NAA时生根效果最佳，根系生长良好；活性碳对壮苗和根的诱导有极大的促进作用，相同的培养基加上500 mg／L的活性炭后加快了生根的速度，提高了生根率和根的质量，并且苗子普遍生长健壮，叶色浓绿。因此最适宜的生根培养基配方为：1／2 MS+NAA0．05+活性炭500 mg／L。具体试验结果见表3、图2。

表2    增殖培养试验结果

    有关活性炭对生根的影响报道很多，朱鹿鸣等报道适量的活性炭有利于月季的组培生根。活性炭有利于生根的原因：①在于其可以吸附切口表面释放的酚类物质，防止苗的褐化；②加入活性炭后可以使苗在一个模拟土壤的暗环境中进行根的发端与发育。结果表明：500 mg／L活性炭对大花月季的生根壮苗有较好的促进作用。

 

图1  A3处理组培苗的生长状况

 

图2  B3处理组培苗的生长状况

 

表3    不同培养基对生根的影响

4结论

    研究发现：以大花月季嫩梢中部茎段为外植体褐化轻，萌芽数多，是建立无菌体系的最佳外植体；MS+6-BA 1．5 mg／L+NAA 0．1 mg／L是最适宜的增殖培养基，增殖率高，苗子健壮；1／2MS+NAA 0．05mg／L+活性碳500 mg／L是最适宜的生根培养基，生根迅速，根粗壮。